SIĞIR VEBASI VİRUSU RBOK AŞI SUŞU NÜKLEOPROTEİN (NP) GENİNİN AÇIKLANMASI

Bu çalışmada, sığır vebası virusu RBOK aşı suşu (SV-RBOK) nükleoprotein (NP) geninin ökaryotik hücrelerde açıklatılması amaçlanmıştır. Sığır vebası RBOK aşı suşu NP geni pGEM-3Zf (-) vektörüne klonlandı. Nükleoprotein genini elde etmek için rekombinant plazmid NheI ve SalI enzimleri ile kesildi. Daha sonra NP geni pCI-neo memeli açıklama vektörüne yerleştirildi. Elde edilen rekombinant plazmid pSV-NP olarak isimlendirildi. pSV-NP geçici olarak Vero hücrelerine transfekte edildi. Vero hücrelerinin 60 kDa’luk NP proteinini açıklaması anti-NP antikorları kullanılarak Western immunbloting deneyi ile incelendi.

In the present study, expression of nucleoprotein (NP) gene of rinderpest virus (RPV) RBOK vaccine strain in eucaryotic cells was performed. The NP gene of RPV-RBOK vaccine strain was cloned into a pGEM-3Zf (-) vektor. The recombinant plasmid was cut with NheI and SalI enzymes to obtain the NP gene. Then, the NP gene was placed into pCI-neo mammalian expression vektor. The resulting recombinant plasmid was named as pSV-NP. pSV-NP was transiently transfected into Vero cells. The presence of the NP proteins was analaysed by Western Immunoblotting demonstrating that Vero cells express a 60 kDa protein reacting with anti-NP antibody.