KOYUN MEME DOKU ARGİNAZ AKTİVİTESİ ÜZERİNE METİLEN MAVİSİNİN İNHİBİSYON ETKİSİ*

Laktasyondaki koyun meme doku arginazının kinetik özellikleri araştırılarak metilen mavisinin enzimi inhibe ettiği tespit edilmiştir. Tiyosemikarbazid- Diasetilmonoksim (TDMU) Yöntemi kullanılarak arginaz aktivitesi spektrofotometrik olarak ölçülmüştür.

Koyun meme doku arginazı, metilen mavisi varlığında 150 W ışığa maruz bırakıldıktan sonra MnCl2 ilavesi ile daha az aktivite göstermiş, MnCl₂ ile preinkübasyona tabi tutulduktan sonra, metilen mavisi uygulandığında aktivitedeki düşüş daha fazla bulunmuştur. Enzim aktivitesinde; oda ışığında %76, karanlıkta %63, 150 W ışıkta ise %66’lık bir inhibisyon görülmüştür. Metilen mavisinin koyun meme doku arginazı üzerindeki inhibitör etkisinin nonkompetitif olduğu ortaya konulmuştur.

Fotoinaktivasyon muhtemelen arginaz molekülünde bulunan histidil artıklarının imidazol gruplarındaki değişiklikle ilişkili olduğu sonucuna varılmıştır.

* Bu çalışma, doktora tezinin bir bölümünden özet olup, FÜNAF (Proje No: 359) tarafından desteklenmiştir.

It was found that methylene blue caused inhibition of enzyme and that its kinetic properties of sheep mammary tissue arginase in lactation. Arginase activity was spectrophotometrically measured using the Tiosemicarbazide diacetylmonoxime urea (TDMU) method.

Following preincubation with MnCl2, exposure to a 150 W (watt) light source and the addition of methylene blue, the activity of arginase was found to be lower than that after preincubation with a 150 W light source, methylene blue and the addition of MnCl₂.

Enzyme inhibition was reduced by 76% in daylight, 63% in darkness and 66% in 150 W light source. The inhibitory effect of methylene blue on sheep mammary tissue arginase was studied and inhibition was found to be noncompetitive.

We concluded that photoinactivation might probably show its effect by modifying imidazole grups of histidyl residues in arginase molecules.