SIĞIR VEBASI VİRUSU RBOK AŞI SUŞU MATRİKS GENİNİN AÇIKLANMASI

Bu çalışmanın amacı sığır vebası (SV) virusu RBOK aşı suşu matriks (M) geninin ökaryotik hücrelerde açıklatılmasıdır. Matriks geni pTOPO XL klonlama vektöründe klonlandı. Elde edilen plasmid EcoRI ve SalI enzimleriyle kesilerek M geni pCI-neo açıklama vektörüne yerleştirildi. pCI-neo Matrix vektöründe M geninin varlığını teyit etmek amacıyla PZR-T ve enzim kesim deneyleri yapıldı. Oluşturulan rekombinant plazmid, pCI-neo Matrix vektörü olarak adlandırıldı. Sonrasında, rekombinant pCI-neo Matrix plazmidi Vero hücrelerine geçici olarak transfekte edildi. Matriks proteinin varlığı Vestern immunoblotlama ile gösterilerek Vero hücrelerinin anti-M antikoruyla reaksiyona giren 38 kDa’luk bir proteini açıkladığı gösterildi.

The aim of this study was to investigate expression of matrix (M) gene of RBOK vaccine strain of rinderpest virus (RPV) in eucaryotic cell. The M gene was cloned into TOPO XL cloning vector. The recombinant plasmid was cut with EcoRI and SalI enzymes to obtain the M gene. Then, the M gene was transferred into pCI-neo mammalian expression vector. So, the resulting recombinant plasmid was named as pCI-neo Matrix. Afterwards, the pCI-neo Matrix vector was transiently tranfected into Vero cells. The presence of the Matrix proteins was showed by Western Immunoblotting Assay demonstrating that Vero cells expressed a 38 kDa protein reacting with anti-M antibody.