İNSAN VE BAZI EVCİL HAYVAN TÜRLERİNİN SERUM ß+PRE- ß LİPOPROTEİNLERİNİN HEPARİN/MnCl2 PRESİPİTASYON METODU İLE KARŞILAŞTIRMALI İZOLASYONLARI

Lipoproteinler, çeşitli dokular arasında depolanma ve kullanım için yağları ve lipitleri nakleden suda-çözünür komplekslerdir. Lipoproteinlerin koroner arter hastalığı riski ve çeşitli tip dislipoproteinemiler ile olan bağlantısı lipoprotein fraksiyonlarının miktar tayinini gerekli kılmaktadır. ß ve pre- ß lipoproteinlerin izolasyonu için en yaygın olarak kullanılan tekniklerden bir tanesi presipitasyon tekniğidir.Bununla beraber laboratuvarda kullanılan lipoprotein ayırım tekniklerinden hiçbiri hayvan lipoproteinlerinde kullanım için geliştirilmemiştir. Bu lipoprotein ayırım yöntemlerinin mevcut hayvan türlerinin plazmasına uygulanmadan önce muhtemelen modifiye edilmesi gerektiği ileri sürülmüştür. Bu nedenle mevcut çalışma, insan ve çeşitli hayvan serumlarındaki ß + pre- ß lipoproteinleri çöktürmek için gerekli heparin/MnCl₂ konsantrasyonlarını karşılaştırmak üzere gerçekleştirildi.Bu amaçla, ilk olarak insan serum lipoproteinleri ve daha sonra çeşitli hayvan türlerinin serum ß + pre- ß lipoproteinleri heparin / MnCl₂ presipitasyon metodu kullanılarak çöktürüldü. Çöktürülen lipoproteinler agaroz jel elektroforez ile tanımlandı. İnsan serumu için sıkça kullanılan orijinal heparin/MnCl₂ çöktürme metodu ile uyumlu olarak 200 IU heparin/MnCl₂ çalışmada mevcut hayvan türlerinin (sığır ve tavuk hariç) serum ß + pre- ß lipoproteinlerini tam olarak çöktürdü. Oysa, sığır serumu aynı lipoprotein sınıflarının çöktürülmesi için insan serumunda kullanılandan yaklaşık 2 kat fazla heparin/MnCl₂ gerektirirken tavuk serumu insandakinin yarısı konsantrasyonu gerektirdi. Bununla birlikte, heparin/MnCl₂ metodu ile presipite edilen lipoproteinlerin tam bir dissosiayonu ve elektroforetik separasyonu elde edilemedi. Bu nedenle, serum ß + pre- ß lipoproteinlerin presipitasyonu için kullanılan polianyon/divalent katyon konsantrasyonlarının insan ve çeşitli hayvan türleri arasında farklılık gösterdiği sonucuna varıldı. Türler arasındaki mevcut farklılıklar, muhtemelen lipoproteinlerin türler arasındaki lipit kompozisyonlarındaki ve yüzey yük yoğunluklarındaki varyasyonlardan kaynaklanmaktadır.

Lipoproteins are water-soluble complexes through which fats and lipids are transported between the various tissues for storage and utilization. Association of lipoproteins with risk of coronary heart disease and various types of dyslipoproteinemias necessitate the quantification of the individual lipoprotein classes. One of the most commonly used techniques for the separation of ß and pre- ß lipoproteins is the precipitation technique. However, none of the lipoprotein separation techniques used in laboratories has been developed for use in animal lipoproteins. It was suggested that lipoprotein separation preocedures might require modification before they are applied to the plasma of a given animal species. Therefore, the present study was undertaken to compare the concentrations of heparin/MnCl₂ necessary in order to precipitate ß + pre- ß lipoproteins of human and various animal sera. The lipoproteins precipitated were separated and identified by agarose gel electrophoresis. In accordance with the original heparin/MnCl2 precipitation method being commonly used for human serum, 200 IU heparin / 46 µ mol MnCl₂ yielded complete precipitation of ß + pre- ß lipoproteins in sera from all the animal species investigated except bovine and chicken. Bovine serum required approx. 2 times more heparin/MnCl₂ for the precipitation of these lipoprotein classes whereas chicken serum required half of the reagent concentration as compared to human serum. However, complete dissociation and electrophoretic separation of the precipitated lipoproteins by the heparin/MnCl₂ method were not achieved. It was concluded therefore that the concentrations of polyanion/divalent cation used for the precipitations of serum ß + pre- ß lipoproteins differ between human and several animal species. The existing differences might be attributed to the variations in charge densities of lipoproteins’ surface as well as to dissimilarities in lipid compositions of the lipoproteins among species.