RANDOM AMPLIFIED POLYMORPHIC DNA (RAPD) YÖNTEMİYLE SIĞIR, KOYUN, KEÇİ VE YABANİ DOMUZ ETİNİN AYIRT EDİLMESİ

Et ve et ürünlerinin orijininin tespit edilmesinde kullanılan yöntemlerde (anatomik farklılıklar, duyusal analizler, doku yağlarının kimyasal özellikleri, histolojik farklılıklar, proteine dayalı testler ve serolojik testler) karşılaşılan güçlükler ve bazı dezavantajlar nedeniyle doğru sonuç veren, basit ve hızlı yöntemlerin geliştirilmesi zorunluluk arz etmektedir. Son yıllarda moleküler biyolojide meydana gelen hızlı gelişmeler, özellikle DNA’nın in vitro olarak kısa sürede çoğaltılmasını sağlayan Polimeraz Zincir Reaksiyon (PZR) yönteminin geliştirilmesiyle bitki, bakteri ve hayvan türlerinin orijini kesin olarak saptanmaktadır.

Bu çalışmada, PZR tabanlı Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) yöntemiyle CGCCCTGGTC dizilimine sahip 10 bazlık primer kullanılmıştır. PZR işlemi 94 º C’de 1 dakika, 37 º C’de 1 dakika, 72 º C’de 2 dakika olmak üzere toplam 45 siklusta gerçekleştirilerek sığır, koyun, keçi ve yabani domuz eti ayırt edilmiştir.

Development of methods for determining the species of origin in fresh and processed meat product that are simpler, faster and more accurate has become a necessity due to difficulties and some disadvantages of the existing methods used for this purpose (anatomical differences, sensory analysis, chemical properties of fat tissue, histological differences, protein based-tests, serological tests). Polymerase Chain Reaction (PCR) is one of the most significant developments occurate in molecular biology in recent years. This tecnique enables amplification of DNA in vitro in a short period of time facilitating determination of species of plant, bacteria or animals.

In the present study, a PCR-based Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) technique was used a 10-base primer (CGCCCTGGTC). Origin of meats from cattle, sheep, goat and wild swine was determined accurately by this method using a PCR procedure of 45 cycles, each of which was programmed as 1 min at 94 º C, 1 min at 37 º C, and 2 min at 72 º C.