SIĞIR HERPES VİRÜS 1 (BHV-1) PROTEİNLERİNİN ELEKTROFOREZ VE VESTERN İMMUNOBLOT METOTLARIYLA ÇALIŞILMASI*

Sığır herpes virüs 1 (BHV-1) proteinleri iki farklı test ile çalışıldı. Öncelikle, Sığır herpes virüs 1 proteinlerinin SDS-PAGE ile analizi amacıyla BHV-1 infekte Sığır Böbrek Hücre (MDBK) ve kontrol MDBK hücre lizatları % 10'luk poliakrilamid jelde elektroforez edildi. Proteinlerin belirlenmesi için jelin Coomassie mavisiyle boyaması yapıldı. Boyama neticesinde, infekte MDBK hücrelerinde, kontrol MDBK hücreleriyle karşılaştırıldığında, farklı proteinler tespit edildi. Ancak, viral proteinlerin tam bir analizi yapılamadı.

Bu çalışmada kullanılan ikinci testte, elektroforezleri yapılan infekte MDBK ve Yeşil Maymun Böbrek Hücre (VERO) proteinleri immun tavşan serumu kullanılarak Vestern İmmunoblot yöntemiyle görüntülendi. Vestern İmmunoblot neticesinde, molekül ağırlıkları yaklaşık olarak 55 kDa, 75 kDa ve 180 kDa olan proteinlerin BHV-1'in antijenik proteinleri oldukları belirlendi.

* Bu araştırma F.Araştırma Fonu (FÜNAF- Proje No: 161) tarafından desteklenmiş, aynı adlı doktora tezinden özetlenmiştir.

Bovine herpes virus 1 (BHV-1) proteins were studied with two different methods. Initially, in order to analyse BHV-1 proteins by SDS-PAGE, BHV-1 infected MDBK and control MDBK cell lysates were subjected to electrophoresis on 10 % polyacrylamide gel. After staining with Coomassie blue, different proteins were determined in the infected MDBK cells. However, precise analysis of viral proteins could not be carried out.

Infected MDBK and VERO cell proteins, subjected to electrophoresis, were also examined by Western blot using immune rabbit serum. As a result, proteins at the molecular weights of approximately 55 kDa, 75 kDa and 180 kDa were determined to be antigenic proteins of BHV-1.